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安徽省2016年高考生物调研性测试题及答案
生 物答案：
39.[生物——选修1：生物技术实践](15分)
【参考答案】(1)分解者(1分)(2)淀粉(2分) 50(1分) 碘液(2分) 透明圈(2分) 酒精灯火焰附近(或超净工作台或无菌条件下)(2分)
(3)液体发酵(1分) 固体发酵(1分) 对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定(3分)
【试题解析】本题以分离筛选能分解淀粉的产淀粉酶芽孢杆菌实验为背景，考查考生对微生物在生态系统中的作用、制备培养基、无菌技术、微生物分离纯化等知识的理解以及实验与探究、综合运用能力。
(1)微生物种类多，代谢类型多样。光能自养和化能自养的微生物，是生态系统的生产者;营寄生生活的微生物，是特殊的消费者;营腐生生活的微生物，是生态系统中的分解者，对生态系统的物质循环起着非常重要的作用。芽孢杆菌是最早应用于水产养殖业的益生菌，进入养殖池后，把养殖动物的排泄物、残存饲料、动植物残骸等有机物迅速分解为CO2、硝酸盐、磷酸盐等，为单细胞藻类生长繁殖提供营养。单细胞藻类的光合作用又为有机物的氧化分解、微生物及养殖生物的呼吸提供溶解氧。这样构成一个良性生态循环，使养殖池里的菌藻趋于平衡，维持和营造良好的水质条件。由芽孢杆菌的作用可以判断其属于生态系统中的分解者。
(2)通过选择培养可以使产淀粉酶芽孢杆菌增殖，确保能够从样品中分离到所需微生物。选择培养基是根据某种或某一类群微生物的特殊营养需要，或对某种化合物的敏感性不同而设计出来的一类培养基。选择培养基允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物生长。本实验配制培养基时，应以淀粉作为唯一碳源，这样可以找到淀粉分解菌，同时筛掉不需要的微生物。
制备培养基时，倒平板是基本操作步骤之一。应将灭菌后培养基冷却至50℃左右，在酒精灯火焰附近倒平板。无论采用涂布平板接种还是平板划线接种，实验操作均应在酒精灯火焰附近(或在超净工作台)进行，避免杂菌污染。
细菌分泌到胞外的淀粉酶可以将淀粉水解成糊精、双糖和单糖等，含有淀粉的培养基在加入碘液后呈蓝色。当培养基中淀粉被淀粉分解菌分泌的淀粉酶分解后，培养基就出现以淀粉分解菌为中心的透明圈。这样，可通过是否产生透明圈来筛选淀粉分解菌。
(3)纤维素酶包含C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三种组分，通过三种酶的协同作用，将纤维素最终分解为葡萄糖。产纤维素酶菌的筛选，通常可以采集富含枯枝落叶的腐殖土为样品，采取选择培养后再经平板分离获得纯菌落。但这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是符合要求的纤维素分解菌，一般首先经特定染色后，在显微镜下观察菌株形态进行初步鉴别。还需要进行发酵产纤维素酶实验，纤维素酶发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。通过定时取样测定发酵产物中碱性纤维素酶的活力。纤维素酶活力的测定方法，一般采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。通过酶活力测定实验，掌握产纤维素酶高产菌株发酵的最适条件及产酶最佳时段，为工业化生产提供依据。
40.[生物——选修3：现代生物科技专题](15分)
【参考答案】(1)DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精(2分)
二苯胺(1分) (2)反转录(1分) 限制性核酸内切酶和DNA连接酶(2分)
分化程度低，增殖能力强，容易培养(3分) (3)接触抑制(2分)
(4)核移植、胚胎移植(2分) 启动子(2分)
【试题解析】本题通过DNA的粗提取和鉴定、基因工程、细胞工程和胚胎工程等知识，考查考生的实验与探究能力，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。
(1)DNA的粗提取的原理是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。首先可利用DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，选择适当的盐浓度使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。其次，可利用DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，将DNA与蛋白质进一步分离。DNA鉴定的原理是在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
(2)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。获取目的基因的方法有多种，如果所需要的目的基因的序列完全不知，或只知道目的基因序列的一段，需要从基因文库中获取;如果所需要的目的基因序列已知，可以通过PCR方式从含有该基因的生物的DNA中直接获得，也可以通过反转录，用PCR方式从mRNA中获得;如果基因比较小，核苷酸序列已知，还可以通过DNA合成仪直接合成。基因表达载体的构建是基因工程的核心，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在、遗传、表达和发挥作用。因此构建基因表达载体不仅需要目的基因、运载体，还必须有启动子、终止子和标记基因等。操作时需用限制性核酸内切酶对目的基因和运载体进行切割，然后用DNA连接酶将切割后的具有相同末端的目的基因和运载体连接起来。作为基因表达载体的受体细胞应该具有易于扩大培养的特点，幼龄动物的成纤维细胞分化程度低，增殖能力强，有丝分裂旺盛，易于培养。目的基因导入受体细胞后，通过检测与鉴定，如能够稳定维持和表达其遗传特性，则可以大规模培养来生产所需产品。
(3)动物细胞在培养瓶中培养时会出现贴壁生长现象，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖，即出现接触抑制现象。因此扩大细胞贴壁的附着面积，可以增加培养瓶中培养的细胞数量。
(4)由于动物细胞的全能性随着分化程度的提高逐渐受到限制，因此用动物的体细胞克隆动物，需要通过核移植和胚胎移植，即将供体动物细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个早期胚胎，然后移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使其发育成一个个体。基因工程细胞可以作为供体细胞获得克隆动物。若要使目的基因在动物的乳腺细胞中特异性表达，需要乳蛋白基因的一个启动子和调控区 ，即需要一个引导泌乳期乳蛋白基因表达的序列，这样才能将目的基因置于乳腺特异性调节序列控制之下，使其在乳腺中表达，再通过回收分泌的乳汁获得所需要的目的基因表达产物。
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