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①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。
②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。
ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：
①固相的抗原或抗体
②酶标记的抗原或抗体
③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
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酶促反应又称酶催化或酵素催化作用，指的是由酶作为催化剂进行催化的化学反应。
生物体内的化学反应绝大多数属于酶促反应。酶作为一种生物催化剂在催化一个化学反应时，既具有一般的催化剂的特征，又具有不同于一般催化剂的特殊性。
普遍性
1、酶与一般催化剂一样，只催化热力学允许的化学反应(即可逆反应);
2、可以加快化学反应的速度，而不改变反应的平衡点，即不改变反应的平衡常数;
3、作用机理都是降低反应的活化能;
4、在反应前后，(环球医学网提供酶促反应的普遍性与特殊性辅导)酶没有质和量的改变，且微量的酶便可发挥巨大的催化作用。
特殊性
但是酶也具有不同于其他催化剂的特殊性。
在酶促反应中，酶作为高效催化剂，使得反应以极快的速度或在一般情况无法反应的条件下进行。
酶是生物体内进行各种化学反应最重要的物质。
特点
一、酶促反应具有极高的效率。
二、酶促反应具有高度的特异性酶的特异性是指酶对底物的选择性，有以下三种类型：
1.绝对特异性 酶只作用于特定结构的底物，生成一种特定结构的产物。如淀粉酶只作用淀粉。
2.相对特异性 酶可作用于一类化合物或一种化学键。例如磷酸酶可作用于所有含磷酸酯键的化合物。
3.立体异构特异性 一种产仅作用于立体异构体中的一种。例如L-乳酸脱氢酶只作用于L-乳酸，而对D-乳酸不起催物作用。
三、酶活性的可调节性四、酶活性的不稳定性。
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2018年卫生资格《检验主管技师》高频考点
慢性髓系白血病
(1)慢性髓细胞白血病(CML)：
Ph阳性CML：t(9;22)染色体异常，又称ph染色体，染色体及G6PD同工酶的分析证实，CML的病变细胞累及髓系细胞(粒、红、巨核细胞系)及B细胞。
Ph阳性CML：多见于以下两种情况：一种见于60岁以上的男性，无t(9;22)染色体异常，脾不大或轻度肿大，白细胞计数30×109/L，以成熟中性粒细胞为主，中性粒细胞碱性磷酸酶积分多在300分以上，无ph染色体，骨髓涂片示粒细胞极度增生，嗜酸及嗜碱性粒细胞不多，红系明显受抑，巨核多正常。
(2)慢性嗜酸性粒细胞白血病(CEL)：
多见于男性，特征为嗜酸性粒细胞明显增多，尚存在不成熟的嗜酸性粒细胞及原始细胞，贫血、血小板增多可减少，ph多阳性。病例可有肝脾淋巴结肿大，易发生心脏纤维化，心肌嗜酸性粒细胞浸润、难治性心衰、中枢神经系统易受累。
总补体溶血活性
【参考范围】比色法：60～120kU/L.
【影响因素】1.在补体测定中标本采集与保存极为重要，即待检标本要新鲜。一般静脉取血后，置室温1h使血液凝固，分离血清后最好2h之内检测完毕，否则应尽快置-20℃保存，避免反复冻溶，以防补体活性降低。
2.补体活性不甚稳定，56℃30min、剧烈振荡、酸碱、乙醇、乙醚、肥皂、蛋白酶等均可使其灭活，因此检测所用器皿要洁净并呈中性。
3.该实验影响因素较多，操作要严格，溶血素、绵羊红细胞等配制要准确。
【临床意义】补体是存在于正常人和脊椎动物新鲜血清中的一组不耐热、经活化后具有酶活性的复杂球蛋白，统称为补体系统，目前已发现该系统包含有30多种可溶性蛋白和膜结合蛋白，其中大部分由肝脏和脾脏中的巨噬细胞合成。补体是机体重要的防御因子，广泛参与抗微生物防御反应及免疫调节，能与任何一种抗原-抗体复合物结合并被激活，产生溶解靶细胞、促进吞噬、清除免疫复合物、参与炎症反应等一系列生物活性反应，同时也可介导变态反应及自身免疫性疾病的病理损伤。
1.CH50升高常见于各种急性期反应，如急性炎症(风湿热急性期、结节性动脉炎、皮肌炎、伤寒、麻疹、黑热病、肺炎、急性心肌梗死、甲状腺炎、阻塞性黄疸)、组织损伤、恶性肿瘤特别是肝癌等可较正常高2～3倍。
2.CH50降低补体消耗增加见于血清病、链球菌感染后肾小球肾炎、SLE、冷球蛋白血症、自身免疫性溶血性贫血、类风湿性关节炎、移植排斥反应等;补体大量丧失见于肾病综合征、大面积烧伤、外伤、手术和失血过多;补体合成不足见于肝硬化、慢活肝、急性肝炎重症患者等。
3.判断补体检测结果时应注意动态观察，最好数种补体成分同时检测，以便对患者病情进行综合分析。
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2018年卫生资格《检验主管技师》辅导资料
结核分枝杆菌的培养特点
培养特点为专性需氧、营养要求高、生长缓慢，常用罗氏固体培养基，在固体培养基上培养2～4周后，形成菜花样R型菌落，液体培养基上呈表面生长，形成菌膜。
尿有形成分的三种检查方法
尿沉渣是尿有形成分经离心沉淀、在显微镜下见到的尿有形成分。这些成分可来自肾脏或尿道脱落的细胞、形成的管型、结晶和感染的微生物、寄生虫等。
尿沉渣检查可以弥补尿理、化检查不足造成的漏诊，对辅助泌尿系统疾病的定位诊断、鉴别诊断及预后判断等有重要意义。目前，尿有形成分检查常用的方法除了传统一般光学显微镜检查法和仪器检查法之外，还有特殊显微镜的检查，主要有：
1.相差显微镜法：是以光的衍射和干涉现象照射标本，产生明暗不同的反差进行识别，有助于辨别透明管型、不典型红细胞、新鲜尿中血小板。
2.偏振光显微镜法：利用光的偏振特性对具有双折射性的物体进行鉴别，如可显示盐类结晶的精细结构。
3.透射电镜法：利用电子束作为“照明波源”可明显提高分辨率，将尿沉渣标本切成超薄片在电子显微镜下观察，可准确分辨出细菌管型、白色念珠菌管型、血小板管型、粗颗粒管型和细颗粒管型等。
立克次体含义与特点
立克次体是介于细菌与病毒之间的微生物，具有以下特点：
①需在活细胞内生长，在代谢衰退的细胞内生长旺盛;
②具典型的细胞壁、有DNA和RNA，呈短小、多形性球杆状，染色后光学显微镜可以查见。
③除Q热、战壕热及立克次体痘症的立克次体外，均与某些变形杆菌(OX19、OX2、OXK株)有共同抗原，故可进行外斐反应(变形杆菌凝集反应)以协助诊断。
④对广谱抗生素，如四环素族、氯霉素等敏感。
⑤其毒素属内毒素性质，为其主要致病物质。
⑥耐低温、干燥，对热和一般消毒剂敏感。
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2018年卫生资格《检验主管技师》复习笔记精选
试管凝集试验
试管凝集试验为半定量试验方法，在微生物学检验中常用已知细菌作为抗原液与一系列稀释的受检血清混合，保温后观察每管内抗原凝集程度，通常以产生明显凝集现象的最高稀释度作为血清中抗体的效价，亦称为滴度。
在试验中，由于电解质浓度和pH不适当等原因，可引起抗原的非特异性凝集，出现假阳性反应，因此必须设不加抗体的稀释液作对照组。
临床上常用的直接试管凝集试验为肥达试验(Widaltest)和外斐试验(Weil-Felixtest)。在输血时也常用于受体和供体两者的红细胞和血清的交互配血试验。
肾小管重吸收磷试验
【参考范围】
0.85～0.95(0.907士0.034)【85%～95%(90.7%±3.4%)】
【影响因素】
1.患者饮食中应固定钙、磷含量(钙0.5～0.7g/d，磷0.7～1.2g/d)，持续5d，于试验第4、5日晨8：00排空膀胱，随即饮水数杯，以保证足够的尿量。
2.饮水完毕后1h取血测定血清磷及肌酐。
3.于2h再次排光膀胱，记录尿量、测定尿磷及尿肌酐浓度。
4.试验时，必须保证准确的钙磷代谢饮食，试验期间饮用水应为重蒸水，并准时、准确记录尿量。
【临床意义】
1.本试验主要反映甲状旁腺的功能状态，对诊断甲旁亢具有一定价值。
2.正常人TRP为0.85～0.95(85%～95%)，甲旁亢时可降至0.60～0.83(60%～83%)。
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科目：1-基本知识2-相关专业知识3-专业知识4-专业实践能力
| 单 元 | 细 目 | 要 点 | 要 求 | 科目 |
| 一、绪论 | 1.概念 | （1）血液学 | 掌握 | 1 |
| （2）临床血液学 | 掌握 | 1，3 | ||
| （3）临床血液学检验 | 掌握 | 1，3 | ||
| 2.血液学与临床的关系 | （1）血液学与疾病的关系 | 掌握 | 3，4 | |
| （2）血液学与检验的关系 | 掌握 |
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精子的功能检查
精子的功能检查目前应用的是精子低渗肿胀试验(HOS)。
1.检测方法：将精子置入低渗溶液中，由于渗透压改变，精子为维持内外体液间的平衡，水分可通过精子膜进入精子，由于精子尾部的膜更柔软、疏松，所以尾部可肿胀或弯曲。用相差显微镜观察，计算100～200个精子中出现肿胀的百分率。
2.结果判断：a型，未出现肿胀;b型，尾尖肿胀;c型，尾尖弯曲肿胀;d型，尾尖肿胀伴弯曲肿胀;e型，尾弯曲肿胀;f型，尾粗短肿胀;g型，全尾部肿胀。
3.参考值：g型肿胀精子率>50%。
4.临床意义：精子尾部低渗肿胀试验可作为体外精子膜功能及完整性的评估指标，预测精子潜在的受精能力。有研究表明，不育症的精子尾部肿胀率明显减低。
免疫细胞的分离
(1)外周血单个核细胞的分离外周血中单个核细胞(淋巴细胞和单核细胞)的比重与红细胞、多核白细胞及血小板不同，介于1.075～1.090之间，因而可利用一种比重介于1.075～1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心，使一定比重的细胞按相应密度梯度分布而加以分离。常用的分层液有Ficoll与Percoll两种。
(2)淋巴细胞的分离1)纯淋巴细胞群的采集：利用单核细胞在37℃和Ca2+存在时，能主动粘附在玻璃、塑料、尼龙毛、棉花纤维或葡聚糖凝胶的特性，从单个核细胞悬液中除去单核细胞，从而获得纯淋巴细胞群。主要的方法有：①粘附贴壁法;②吸附柱过滤法;③磁铁吸引法。
2)淋巴细胞亚群的分离原则：选择纯化所需细胞的方法是阳性选择法，而选择性去除不要的细胞，仅留下所需的细胞为阴性选择法。常用的方法包括：①E花环沉降法;②尼龙毛柱分离法;③亲和板结合分离法;④磁性微球分离法及荧光激活细胞分离仪分离法。
(3)淋巴细胞的保存与活力测定①短期保存技术：短期保存可置于4℃保存。
②长期保存技术：液氮深低温(-196℃)环境保存细胞，加入二甲亚砜作为保护剂。
③活力测定：最简便常用的为台盼蓝染色法，呈蓝色。
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2017年卫生资格检验主管技师考点：血清的鉴别方法
血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被激活，血液迅速凝固，形成胶冻。凝血块收缩，其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。
在凝血过程中，纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆最大的区别。而在凝血反应中，血小板释放出许多物质，各凝血因子也都发生了变化。
这些成分都留在血清中并继续发生变化，如凝血酶原变成凝血酶，并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。
但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰，血液中许多化学成分的分析，都以血清为样品。
血浆组织因子
【参考范围】30～220μg/L(ELISA法)。
【影响因素】
1.最好采用硅化或塑料注射器。玻璃试管等需涂硅处理或使用塑料制品。因为玻璃可以激活凝血反应。
2.理想的抗凝剂应首选枸橼酸钠。
3.止血带不应扎得太紧，时间最好不超过5min，并强调采血顺利，以防激活凝血机制。
【临床意义】
1.血浆TF水平如果升高可以考虑全身炎症反应，如内毒素作用、严重创伤、休克、ARDS或各种原因引起的DIC.
2.体内某些活性物质增高，如肿瘤坏死因子、白细胞介素-1、白细胞介素-6大量分泌时，TF水平也会同步升高，且往往呈平行表达，在疾病好转或治疗有效时，水平下降。
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2017检验主管技师知识点：血清β2微球蛋白测定
● 血清β2微球蛋白测定
微球蛋白(β2m)分子量为ll.8KD的小分子蛋白质，主要由淋巴细胞生成，存在于有核细胞膜上。肿瘤细胞合成β2m的能力很强。血中的β2m可自由通过肾小球，几乎全部(99.9%)在近曲小管(PCT)重吸收，经小管上皮细胞吞饮作用进入细胞内，被溶酶体消化分解为氨基酸供机体再利用，由尿排出者仅占0.1%.
测定方法：β2m测定过去以RIA法为主，80年代以后有EIA法、免疫浊度分析等方法。
禁饮试验的影响因素
【影响因素】禁饮试验可鉴别尿崩症与精神性多饮，但不能鉴别中枢性尿崩症与肾性尿崩症，可加做加压素试验将二者区分开来。
【临床意义】
1.正常人限制饮水后，VP分泌和释放将增加，可促进远端肾小管和集合管对水的重吸收增加以减少尿量，其尿渗透压和比重将增高，血渗透压降低。
2，禁水5h后尿量无明显减少，尿比重亦无明显上升，且连续2次尿比重相同，体重下降3%以上，可初步诊断为尿崩症。若尿量明显减少，尿比重明显上升，体重下降不明显，应考虑为精神性多饮。如进一步明确诊断，可延长禁水时间至12～16h.
凝胶层析知识
凝胶层析又称分子筛过滤或排阻层析等。固定相是多孔凝胶，各组分的分子大小不同，因而在凝胶上受阻滞的程度也不同。
本法的优点是所用凝胶属于惰性载体，吸附力弱，操作条件温和，不需要有机溶剂，对高分子物质有很好的分离效果。
常用的凝胶有Sephadex G系列。凝胶层析可用于脱盐、分离提纯、测定高分子物质的分子量、高分子溶液的浓缩等。
...留学群卫生资格考试栏目小编们精心为广大考生准备了“2017卫生资格《检验主管技师》要点：胆色素肝肠循环”，各位同学赶快学起来吧，做好万全准备，祝各位同学考试顺利通过。
胆色素肝肠循环
又称为肠肝循环(enterohepticcycle)。指经胆汁或部分经胆汁排入肠道的药物，在肠道中又重新被吸收，经门静脉又返回肝脏的现象。此现象主要发生在经胆汁排泄的药物中，有些由胆汁排入肠道的原型药物如毒毛旋花子苷G，极性高，很少能再从肠道吸收，而大部分从粪便排出。有些药物如氯霉素、酚酞等在肝内与葡萄糖醛酸结合后，水溶性增高，分泌人胆汁，排入肠道，在肠道细菌酶作用下水解释放出原型药物，又被肠道吸收进入肝脏。动物实验显示，抗菌药物抑制肠道细菌后，可降低某些药物的肝肠循环。肝肠循环可使药物在体内停留时间延长，延长多少取决于进入肝肠循环的量与给药量的比例。
肠道中约10%～20%的胆素原可被肠道粘膜细胞重吸收，经门静脉入肝。其中大部分再随胆汁排入肠道，形成胆素原的肝肠循环(bilinogenenterohepaticcirculation)。只有少量经血液循环入肾并随尿排出。正常人每日随尿排出约0.5～4.0mg胆素原。胆素原接触空气后被氧化成尿胆素，后者是尿的主要颜色。游离胆红素经肝转化生成的葡萄醛酸胆红素随胆汁进入肠道，在回肠末端和结肠内细菌作用下，脱去葡萄醛酸，并还原生成胆素原(包括d-尿胆素原，中胆素原，粪胆素原)。在肠道下段，这些无色的的胆素原接触空气后被氧化成胆素(相应的为d-尿胆素，i-尿胆素和粪胆素)。胆素呈黄褐色，是粪便的主要颜色。当胆道完全梗阻时，因胆红素不能排入肠道形成胆素原和进而形成胆素，所以粪便呈现灰白色。新生儿的肠道细菌稀少，粪便中未被细菌作用的胆红素使粪便呈橘黄色。
转铁蛋白(TRF)
1.转铁蛋白(TRF)概况：
转铁蛋白是血浆中主要的含铁蛋白质。分子量：7.7万。含糖量：6%.肝脏合成，半寿期7天。
2.功能：
以TRF–Fe3+的形式运输内源性与外源性铁，与成熟红细胞的生成有关。一分子TRF可以结合2个Fe3+(1mg运铁蛋白可结合1.3μg铁)。TRF的浓度受Fe供应的调节，缺铁时TRF升高。自由铁对机体有害，与TRF结合，还可防止Fe从肾丢失。
3. 临床意义：
(1)TRF用于贫血的诊断和治疗监测：
100ml血清具有结合338μgFe的能力，但通常结合铁仅100μg即铁饱和度为30-38%.
缺铁性低血色素贫血：TRF升高，但铁饱和度降低;
再生障碍性贫血：RBC对Fe利用低，TRF下降或正常，但铁饱和度高。
(2)急性时相反应TRF下降，炎症、恶性病变随Alb、PA同时下降。
(3)肾病综合症、营养不良、慢性肝病下降，可作为营养状态指标。
(4)妊娠、口服避孕药或注射雌激素可使TRF升高。
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